日日视频-在线视频亚洲-摸bbb搡bbb搡bbbb-久久国产精品无码一级毛片-日韩一区不卡-日本激情在线-国产精品久久久久久久久借妻-国产成年人免费视频-a在线看-麻豆精品91-中文字幕乱码视频-91丝袜呻吟高潮美腿白嫩在线观看-麻豆一区二区在线观看-亚洲av无码专区在线-中文字幕在线二区

　　
　　一、材料、試劑和儀器
　　
　　1、材料：植物總RNA5-10μg
　　
　　2、試劑：
　　
　　1)加樣運載緩沖液(Loadingbuffer)
　　
　　50%甘油
　　
　　1mmol/LEDTA(pH8.0)
　　
　　0.25%溴酚藍
　　
　　25%二甲苯氰FF
　　
　　2)10×TAEBuffer
　　
　　3)5×甲醛凝膠電泳緩沖液：
　　
　　0.1mol/LMOPs(pH7.0)
　　
　　40mmol/L乙酸鈉
　　
　　5mmol/LDETA(pH8.0)
　　
　　4)甲醛，甲酰胺
　　
　　3、儀器：電泳裝置，紫外透射觀測儀
　　
　　二、實驗程序
　　
　　1、甲醛變性的瓊脂糖(Agarose)凝膠的配制
　　
　　在250mL的錐形瓶中準確稱量2gAgarose(Sigama)，再加20mL10×TAEBuffer，144mLDEPC處理過的雙蒸水，微波爐中化膠，待冷卻至50-60℃加EB至終濃度≤0.5μg/mL。在通風櫥中加入36mL甲醛，放置一段時間以減少甲醛蒸汽。
　　
　　2、RNA的甲醛變性電泳
　　
　　1)樣品制備
　　
　　RNA總量10μg
　　
　　5×甲醛凝膠電泳緩沖液4μl
　　
　　甲醛3.5μl
　　
　　甲酰胺10μl
　　
　　加入無菌離心管中混合，95℃水浴變性2min(或55℃，15min)，取出后放入冰中冷卻。
　　
　　2)加入2μl無菌的DEPC處理的加樣運載液。(使用加樣運載液的目的有三：增大樣品密度，以確保DNA均勻進入樣品孔內；使樣品呈現顏色，便于加樣操作；能明確顯現樣品在電泳膠上的泳動位置。以0.5XTBE作電泳液時，溴苯酚在瓊脂糖中的泳動速率與長300bp的雙鏈線狀DNA相同，而二甲苯氰FF的泳動速率與長4kb的雙鏈線狀DNA相同。)
　　
　　3)將膠板浸沒在1×甲醛凝膠電泳緩沖液中，點樣前5V/cm預跑5min。點樣后3-4V/cm電泳。
　　
　　4)電泳結束后(溴苯酚藍遷移到約8cm處)，紫外燈下觀察，照相